核酸蛋白檢測(cè)儀與紫外分析儀的定義和聯(lián)系
核酸蛋白檢測(cè)儀與紫外分析儀的定義和聯(lián)系 | 時(shí)間: December-15 11:52:56 | 分類:技術(shù)欄目
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核酸蛋白檢測(cè)儀是層析分析的主要裝置，核酸蛋白檢測(cè)儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(tǒng)（根據(jù)需要選配）和電腦打印設(shè)備即構(gòu)成一套完整的核酸蛋白檢測(cè)儀分離層析系統(tǒng)。它是當(dāng)今從事生命科學(xué)研究、藥物測(cè)定、化工、食品科學(xué)及醫(yī)學(xué)研究等行業(yè)的現(xiàn)代分析實(shí)驗(yàn)儀器。核酸蛋白檢測(cè)儀分析系統(tǒng)廣泛用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、科研和大專院校的科學(xué)研究和教學(xué)實(shí)驗(yàn)。
核酸蛋白檢測(cè)儀其原理是根據(jù)物質(zhì)（樣品）對(duì)紫外光有明顯吸收的特征，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品成份含量比對(duì)分析，以便進(jìn)行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識(shí)別檢測(cè)和含量測(cè)定。在生化分析、環(huán)保科學(xué)、食品研究、毒理研究、新藥開發(fā)等領(lǐng)域中對(duì)核酸、蛋白檢測(cè)、純化和提取提供了一種獨(dú)特的分析手段。
紫外分析儀
紫外檢測(cè)原理基于被測(cè)組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同，當(dāng)被檢測(cè)組分通過檢測(cè)窗時(shí)，吸光度發(fā)生變化服從朗伯-比爾定律，即在一定的實(shí)驗(yàn)條件下，吸光度與被測(cè)組分的濃度成正比。
紫外分析儀用于核酸蛋白檢測(cè)
紫外-可見光分光光度計(jì)在生物科技中可用于測(cè)定核酸和蛋白質(zhì)的濃度。
首先，核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是核苷酸。核苷酸由一個(gè)含氮堿基（嘌呤或嘧啶），一個(gè)戊糖（核糖或脫氧核糖）和一個(gè)或幾個(gè)磷酸組成。由于核酸的堿基具有共軛雙鍵，因而有紫外吸收的性質(zhì)。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區(qū)別。核酸的紫外吸收峰在260nm附近，可用于測(cè)定核酸。根據(jù)260nm與280nm的吸收光度（A260）可判斷核酸純度。
再談蛋白質(zhì)，構(gòu)成它的組成是氨基酸，其中的種類包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸，這幾種芳香族氨基酸的苯環(huán)含有共軛雙鍵，使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)。吸收高峰在280nm處，其吸光度（即光密度值）與蛋白質(zhì)含量成正比。所以，紫外吸收法是280nm 的光吸收法，含有核酸的蛋白質(zhì)溶液使用280 和260 nm 的吸收差法較好。蛋白質(zhì)的稀溶液采用215 與225 nm的吸收差法。
此外，蛋白質(zhì)溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長(zhǎng)下，蛋白質(zhì)溶液的光吸收值與蛋白質(zhì)濃度的正比關(guān)系，可以進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。紫外吸收法簡(jiǎn)便、靈敏、快速，不消耗樣品，測(cè)定后仍能回收使用。
還有一些測(cè)定蛋白質(zhì)的方法，是通過蛋白質(zhì)與一些物質(zhì)的作用產(chǎn)生顏色，然后在此有色光光譜內(nèi)測(cè)定吸光度。將已知濃度的蛋白質(zhì)溶液稀釋幾個(gè)倍數(shù)，與物質(zhì)作用后作為標(biāo)準(zhǔn)品，測(cè)定吸光度做出一條曲線，然后未知溶液的濃度就可通過吸光度來得出。這些方法包括，凱氏定氮法，考馬斯亮藍(lán)法（Bradford），F(xiàn)olin-酚試劑法（Lowry法）和BCA法。
