美國Bio-Rad公司的Trans-Blot SD型半干轉(zhuǎn)印系統(tǒng)是在電場(chǎng)的作用下把聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠上的蛋白或核酸條帶轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，其運(yùn)用了電泳檢測(cè)的方法，使得蛋白或核酸從凝膠中進(jìn)行分離轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，由于硝酸纖維素膜的可支撐性，使得蛋白或核酸條帶能夠在電泳后繼續(xù)做雜交等后續(xù)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)，是一種普通，簡(jiǎn)單，快速的轉(zhuǎn)印方法。該系統(tǒng)無需緩沖液池或凝膠盒，可達(dá)到快速、有效、經(jīng)濟(jì)的轉(zhuǎn)印目的。平板電極提供一致可靠的轉(zhuǎn)移，可轉(zhuǎn)移多塊凝膠，安裝快速方便。

二.用途：

主要應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，定量和定性分析基因表達(dá)，和特定蛋白質(zhì)表達(dá)，用于相關(guān)的Northern雜交、Southern雜交和Western雜交分析方法，可在10-35分鐘內(nèi)完成。

三.使用：

準(zhǔn)備緩沖液、凝膠

1．根據(jù)凝膠平衡、三明治裝置、電泳過程等所需要的緩沖液用量準(zhǔn)備足夠的緩沖液。

 

2．使用去離子水浸潤凝膠，并在轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡15min。

所用凝膠須在緩沖液中平衡，除去電泳過程中所帶的鹽分；在轉(zhuǎn)印過程中，這些鹽會(huì)引起轉(zhuǎn)印緩沖液導(dǎo)電性升高，產(chǎn)生大量的焦耳熱。不同濃度的凝膠和不同的緩沖液組分，會(huì)引起凝膠的收縮和膨脹，因此平衡過程可以使凝膠調(diào)整到電轉(zhuǎn)印前較合適的尺寸大小。當(dāng)電泳緩沖液和轉(zhuǎn)印緩沖液組分相同時(shí)，可不進(jìn)行平衡過程（如，非變性凝膠）。將凝膠、印記膜夾放在兩層濾紙中間形成三明治結(jié)構(gòu)。

如果使用超厚濾紙，每側(cè)則只需要1張;如果使用超厚或薄的濾紙，每側(cè)則需要2－3張。

半干轉(zhuǎn)印系統(tǒng)中，濾紙起到存儲(chǔ)電轉(zhuǎn)印緩沖液的作用，因此用量的多少非常重要。為避免污染，請(qǐng)佩戴手套接觸凝膠、印記膜和濾紙。

3．相對(duì)于每一張凝膠，需要按尺寸裁減出一張印記膜、兩到六張濾紙。Bio-Rad公司提供了預(yù)切膜和濾紙。

4．在電轉(zhuǎn)印緩沖液中潤濕濾紙。

5．將印記膜放入電轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡。組裝三明治結(jié)構(gòu)前，膜必須全部浸潤。硝酸纖維素膜可直接在轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡；首先PVDF膜需要100％甲醇浸潤后，再在緩沖液中平衡。

6．小心打開安全蓋，取下陰極裝置。

7．將預(yù)先潤濕的超厚濾紙平房在陽極板上，用滾筒驅(qū)趕氣泡。如果使用厚或薄的濾紙，則疊加2－3張濕潤的濾紙，并驅(qū)趕氣泡。

8．將預(yù)先浸潤的印記膜小心放在濾紙上，驅(qū)趕氣泡。

9．將平衡后的凝膠放在印記膜上，將凝膠放在印記膜中央，如果凝膠超出印記膜外有所偏離，將不能達(dá)到全部轉(zhuǎn)印，要裁剪同樣尺寸的印記膜和濾紙。

放置后盡量不要移動(dòng)轉(zhuǎn)印膜，以防止產(chǎn)生玷污印記和人為印跡。用滾筒驅(qū)趕氣泡，使凝膠和印記膜完全接觸。

10．在凝膠上方放入另外一塊潤濕后的超厚濾紙；如果使用厚或薄的濾紙，則疊放2－3張潤濕后的濾紙，并驅(qū)趕氣泡。擦干凝膠/印跡膜三明治結(jié)構(gòu)外過量的緩沖液，以防止電流泄漏。

11．小心蓋上陰極蓋。

12．加蓋裝置的安全蓋。

轉(zhuǎn)印過程

13．接通電源，設(shè)置電泳儀參數(shù)，Mini-凝膠：10-15V/5.5mA/cm², 10-30min；

大凝膠：15-25 V/5.5mA/cm², 30-60min，開始轉(zhuǎn)印過程。

14．轉(zhuǎn)印結(jié)束后關(guān)閉電源，取下轉(zhuǎn)印夾，拆卸凝膠三明治裝配，用ddH₂O清洗印記膜，確保膜上無剩余凝膠和樣品，之后進(jìn)行樣品檢測(cè)、成像。