電泳儀使用方法及注意事項(xiàng)
電泳儀使用方法及注意事項(xiàng) | 時(shí)間: September-11 16:04:18 | 分類:技術(shù)欄目
凌儀生物提供高速離心機(jī)，美國(guó)Bio-rad伯樂電泳，德國(guó)eppendorf艾本德移液器，美國(guó)ABI基因擴(kuò)增儀PCR，雅培原位雜交儀，Thermo熱電離心機(jī)等實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備，以及Corning康寧，Axygen愛思進(jìn)，Greiner格瑞拉等耗材要省錢，別錯(cuò)過哦。 1.電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后，禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分，也不能到電泳槽內(nèi)取放東西，如需要應(yīng)先斷電，以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端，以防漏電。
2.儀器通電后，不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭，以防短路現(xiàn)象發(fā)生，雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲，但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
3.由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同，電泳時(shí)所通過的電流量也不同，其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同，故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
4.在總電流不超過儀器額定電流時(shí)（較大電流范圍），可以多槽關(guān)聯(lián)使用，但要注意不能超載，否則容易影響儀器壽命。
5.某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí)，允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機(jī)，但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機(jī)，否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng)，容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。
6.使用過程中發(fā)現(xiàn)異?，F(xiàn)象，如較大噪音、放電或異常氣味，須立即切斷電源，進(jìn)行檢修，以免發(fā)生意外事故。
研發(fā)背景
1937年，瑞典生化學(xué)家Tiselius集前人百余年探索電泳現(xiàn)象之大成，發(fā)明了Tiselius電泳儀，在此基礎(chǔ)上建立了研究蛋白質(zhì)的自由界面電泳方法，利用該法首次證明人血清是由白蛋白（A）、Α、β、γ球蛋白組成，并因此于1948年獲得阿果獎(jiǎng)。隨后電泳技術(shù)的發(fā)展突飛猛進(jìn)，1949年，RicketlsMarrack等人證明人血清蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離可依次分為白蛋白，Α1、α2、β、γ球蛋白五個(gè)組分，1957年Reiner對(duì)人血清五個(gè)組分蛋白進(jìn)行了定量分析。
但自由界面電泳沒有固定支持介質(zhì)，擴(kuò)散和對(duì)流作用較強(qiáng)，影響分離效果，于是在50年代相繼出現(xiàn)了固相支持介質(zhì)電泳。較初的支持介質(zhì)是濾紙和醋酸纖維素膜，目前這些介質(zhì)在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)應(yīng)用較少。在很長(zhǎng)一段時(shí)間里，小分子物質(zhì)如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙、纖維素或硅膠薄層平板作為介質(zhì)進(jìn)行電泳分離、分析，但目前一般使用靈敏度更高的技術(shù)如高效液相色譜法(HPLC)等來進(jìn)行分析。而對(duì)于復(fù)雜的生物大分子，以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質(zhì)進(jìn)行電泳，其分離效果并不理想。于是1959年，Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝膠作支持介質(zhì)建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳，從而大大提高了電泳的分辨率和分離效果，增強(qiáng)了電泳技術(shù)的發(fā)展、滲透及與其他技術(shù)結(jié)合配套的能力。致使各式各樣的電泳技術(shù)和電泳材料如雨后春筍、競(jìng)相爭(zhēng)榮，成為當(dāng)代實(shí)驗(yàn)科學(xué)技術(shù)中品種繁多、應(yīng)用廣泛、基礎(chǔ)與尖端技術(shù)皆備的大技術(shù)。
根據(jù)電泳中是否使用支持介質(zhì)分為自由電泳和區(qū)帶電泳。
自由電泳不使用支持介質(zhì)，電泳在溶液中進(jìn)行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳指懸浮在溶液中的帶電粒子（如各種細(xì)胞）通電后全部移動(dòng)，不出現(xiàn)界面，如顯微電泳等。自由界面電泳中被分離物質(zhì)集中在某一層，形成各自的界面而進(jìn)行定性或定量分析。自由界面電泳需要昂貴精密的電流儀器，僅在少數(shù)特殊電泳如等電聚焦電泳和等速電泳中使用。
區(qū)帶電泳都使用支持介質(zhì)，根據(jù)支持介質(zhì)不同分為濾紙電泳、醋纖膜電泳、薄層電泳和凝膠電泳等。此外，根據(jù)支持介質(zhì)的裝置形式不同又可分為水平板式電泳、垂直板式電泳、垂直盤狀電泳、毛細(xì)管電脈、橋形電泳和連續(xù)流動(dòng)電泳等
