如何選擇紫外分光光度計？
如何選擇紫外分光光度計？ | 時間: September-20 12:23:21 | 分類:技術(shù)欄目
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研究者們有眾多的新紫外光分光光度計可選。自從60年前紫外分光光度計出現(xiàn)在實驗室的工作臺之后，這種能解決廣泛難題的儀器可以從單一波長的測量到高性能多光譜進行測量分析。科學(xué)家們選擇時需要根據(jù)自己實驗室的需要和目的用途來考慮，光學(xué)構(gòu)造和光源、探測方法、樣品類型和數(shù)據(jù)處理等都是要考慮的因素。
光學(xué)構(gòu)造（OPTICAL CONFIGURATION）
一般來說，紫外光分光光度計分為單光束和雙光束兩類。顧名思義，單光束型主要是依賴單束光進行測量。一束給定波長的光通過對照物，然后再通過實際樣品溶液，就能得到吸光結(jié)果。
雙光束型則是通過一個斬光輪（mirrored chopperwheel）將一束光分成兩束，分別測量對照樣品和實際樣品?？梢暂^小化光漂移（lampdrift）和減少測量時間。一些雙光型光度計不利用斬光輪，而是利用一種光束分光器來代替，將一束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度，所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時間動態(tài)變化的研究中大有用處。
光源和檢測方法（LIGHT SOURCES AND DETECTION）
分光光度計的光譜也是需要考慮的一個重要因素。實驗室研究人員希望省錢購入專門儀器定量核酸、蛋白或者細菌的生長情況。例如AmershamBiosciences of Piscataway公司的GeneQuantII能在230、260、280、320、595和600nm的波長下測量樣品。果果需要更大的靈活性，研究者可以考慮一種更高性能的寬光譜儀器，可以程序性地進行ELISAs分析和比色分析。
紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長，通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。Varianof Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies ofTokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是這樣的儀器。
一些儀器具有多種光源供選擇：紫外光、可見光和甚至紅外光（780 nm 至3,000nm）。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分（大約380 nm 到800 nm）。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。
分光光度計的帶寬（bandwidth）很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度?？梢酝渡涑鰧嶒灳_要求的光譜。一種嚴格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進行高分辨率的吸光測量?？勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要。
為了測量吸光值，分光光度計制造商通常使用光電倍增管（photo-multipliertubes，PMTs）和光敏二極管。PMTs提供快速的反應(yīng)時間和良好的靈敏度，并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍。但一些制造商依賴于光敏二極管的動態(tài)范圍在數(shù)秒內(nèi)行使所有的光譜測量。
樣品類型（SAMPLE FORMAT）
在大部分的樣品類型中，分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規(guī)模的實驗室需求。但盡管對于小實驗室來說，制造商仍然提供了多種容器轉(zhuǎn)換器來滿足通量的要求和減少實驗時間。
用小試管cuvette裝樣品容量一般從1 μl-5ml，并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現(xiàn)了柔韌性。
數(shù)據(jù)管理（DATA MANAGEMENT）
大部分單機型的分光光度計包含了驅(qū)動儀器運行和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能的儀器，通常與PC機一起聯(lián)用，需要從制造商提供額外的軟件。同時用戶也可以選擇升級軟件以滿足他們的需要。
另外一個值得考慮的因素是數(shù)據(jù)的較終使用。各獨立實驗室都有各自感興趣的實驗結(jié)果。例如一些藥物機構(gòu)需要考慮美國FDA的要求和歐聯(lián)盟的藥物評價機構(gòu)的要求選擇不同的數(shù)據(jù)處理方式
